Autoimmunité

CARDIOLIPINE - Β2-GLYCOPROTEINE

Les anticorps anti-cardiolipines et β2-Glycoprotéine sont des marqueurs sérologiques importants pour le diagnostic du syndrome anti- phospholipidique. Ce syndrome va de pair avec des manifestations cliniques variées, isolément ou en association avec d'autres maladies auto-immunes tel que le lupus systémique érythémateux (SLE).

ELISA

 

 

  • L'ELISA anti-cardiolipine pour une détermination simultanée des immunoglobulines de type A, M ou G.
  • L'ELISA anti- ß-2-glycoproteïne pour une détermination simultanée des immunoglobulines de type A, M ou G.

 

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Principe des tests ELISA
• La phase solide est constituée d'une  microplaque contenant des strips de polystyrène coatés avec les antigènes caractérisés purifiés.
• Si l'échantillon est positif, les anticorps spécifiques se trouvant dans le sérum dilué vont se lier aux antigènes couplés à la phase solide.
• Dans une deuxième étape, les anticorps liés sont détectés par des anticorps anti-humains marqués à la péroxidase.
• Dans une troisième étape, le complexe formé est rendu visible par l'utilisation d'une solution chromogène/substrat permettant une réaction colorée. L'intensité de la couleur produite est proportionnelle à la concentration d' anticorps présents dans l'échantillon .
Calibration/Evaluation des tests ELISA EUROIMMUN :
• Pour les ELISA quantitatifs ; Utilisation de 3 calibrateurs dont le deuxième sert de valeur cut-off. Les unités sont exprimées en RU/ml (relative units per milliliter) ou, s'il existe des références internationales, en IU/ml (international units per milliliter).
• Pour les ELISA semi-quantitatifs ; Utilisation d' 1 calibrateur. Le résultat sera alors exprimé en index.
• Pour chaque test des contrôles spécifiques positif et négatif sont fournis avec leurs valeurs cibles.
Facilité et rapidité des tests ELISA EUROIMMUN :
• Puits sécables (excepté pour les Profile ELISA) et marqués de l'abréviation de l'antigène.
• Réactifs prêts à l'emploi (sauf pour le tampon de lavage)
• Réactifs colorés pour une identification positive :
o Calibrateur 1 : Rouge foncé
o Calibrateur 2 : Rouge
o Calibrateur 3 : Rouge clair
Contrôle positif: Bleu foncé
o Contrôle négatif : Vert
o Tampon de dilution : Bleu clair
o Tampon de dilution IgM : Vert clair
o Conjugé anti-IgA : Orange
o Conjugué anti-IgG : Vert
o Conjugué anti-IgM : Rouge
o Conjugué anti-IgGM : Turquoise
o Conjugué anti-IgGMA : Jaune
• Les tampons de dilution des échantillons pour la détection des anticorps IgM en sérologie infectieuse contiennent déjà un absorbant IgG/RF.
• Plusieurs tests peuvent être combinés sur une même microplaque car les temps d'incubation sont identiques pour tous les ELISA ( 30 min ; 30 min ; 15min).
• Les incubations se font à température ambiante.
• Compatibles avec tous les systèmes commerciaux de lavage et  lecture de microplaques.